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干货|PG电子胎牛血清(FBS)使用注意事项

来源:池钧毅 日期:2025-03-15

胎牛血清的标准储存温度为-20℃,为确保更长期的储存可以选择-80℃。在解冻过程中,不建议将血清直接置于室温(25-37℃)下,这样容易导致絮状沉淀,进而影响血清的品质。最佳的解冻方法是先将血清从-20/-80℃转移至4℃,待其完全融化为液体后,再将其转移至室温。在解冻的过程中,需定期摇晃样品,以确保血清中的成分与温度均匀混合,帮助减少沉淀的产生。

干货|PG电子胎牛血清(FBS)使用注意事项

解冻后的胎牛血清可使用15mL或50mL的无菌离心管进行分装和保存。为方便经常配制培养基,可以将一管已解冻的血清存放在4℃,但不宜存放过久,最好在一个月内使用完毕。解冻后的血清不应在37℃或室温下存放过长时间,以避免重要的细胞生长因子失活,影响细胞的状态。

在细胞培养中,血清的添加量应适度,通常为5%、10%或20%。大多数细胞正常培养时推荐使用10%的血清浓度,而某些原代细胞可能需使用20%血清。具体适合某一细胞株的血清浓度应根据细胞特性和实验目的进行调整。

热灭活是指在56℃下处理已解冻的血清30分钟,此步骤能去活化补体,避免其参与的各种反应,如溶细胞活性、肥大细胞和血小板组胺释放等。对于常规细胞培养而言,热灭活并不是必要步骤,经过热灭活的血清对细胞生长的作用很小,甚至可能因高温处理降低血清质量,导致细胞生长速率下降和沉淀物增多。

在细胞培养中经常会遇到需要更换血清的情况。如果直接将另一款血清配制的培养基用于细胞培养,可能会导致细胞增殖速度减缓或出现脱壁死亡。这通常是因为细胞适应了之前的培养环境,突然更换即使是质量更好的血清,也可能造成应激反应。在更换血清时,建议遵循梯度替换的原则,以帮助细胞逐步适应新的营养环境。

当使用新血清进行细胞复苏时,建议使用原培养体系以确保细胞状态恢复后再进行后续实验。细胞培养液的更换可按比例逐步替换,例如首次采用1:3比例,第二次采用1:1比例,第三次采用3:1比例,最后完全替换。

解冻后如果发现血清中出现少量乳白色絮状沉淀,这些通常是血清中的脂蛋白变性或解冻后纤维蛋白造成的,通常不会影响血清质量。应用400×g离心5分钟可去除这些沉淀物,对细胞影响不大。

一般情况下,厂家提供的血清是无菌的,无需额外过滤。如果发现血清中有悬浮物,可以将其加入培养液中一起过滤,避免直接过滤血清。

如果在细胞培养过程中观察到黑点出现,首先应检查培养基是否混浊,黑点是否规则游动。一旦发现细菌污染,微生物会迅速繁殖,导致培养基变黄并混浊。若观察到细胞生长状态很好且与黑点出现前无变化,黑点可能是以下原因造成的:(1)细胞在生长过程中自然破碎后的残骸;(2)血清中的杂蛋白,可能由反复冻融引起;(3)培养基所用水质或容器不达标。可通过离心或过滤方法去除这些杂质;(4)原代细胞中的黑点可能是组织杂质,需通过多次传代来去除。

对于科研工作者而言,PG电子提供多种规格的胎牛血清,兼具优质的售前和售后服务,作为一个值得信赖的大品牌,我们将竭诚为您提供所需的产品与支持。

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